استجابة الخمائر للمواد الدبالية
المقدمة
يوجد حاليًا العديد من الطرق الكيميائية والبيولوجية لتحديد المركبات الفعالة فسيولوجيًا ذات الأصل النباتي، مثل الفيتامينات والأوكسينات والجيبريلينات وغيرها. ومع ذلك، تظل طرق تقييم النشاط البيولوجي للمواد الدبالية قليلة الدراسة، على الرغم من أهميتها للكيميائيين والأطباء وعلماء الكيمياء الحيوية.
تعتبر الطرق الكيميائية لتحديد المواد الدبالية معقدة بسبب عدم تجانس هذه المركبات، كما أن نشاطها البيولوجي لا يرتبط دائمًا بالتركيب الكيميائي. لذلك، يبقى الاختبار الحيوي المعيار الموضوعي الوحيد للتقييم. الطرق الحالية، التي تعتمد على قياس نمو جذور الشعير أو الطحالب، معقدة ولا يمكن تكرارها دائمًا.
لحل هذه المشكلة، كان من الضروري اختيار اختبار حيوي حساس وبسيط وقابل للتكرار، مناسب للدراسات المتسلسلة. تم أخذ ردود الفعل المرتبطة بمراحل مختلفة من نمو الخلايا في الاعتبار — التمدد والانقسام.
اختبار الخمائر
تم اقتراح فكرة استخدام اختبار ميكروبيولوجي لتقييم المواد البيوكاتاليزية في الخث بواسطة بوتوملي (1915)، لكنها لم تتطور. قمنا بدراسة الخمائر Saccharomyces cerevisiae واكتشفنا أن هومات البوتاسيوم من ليونارديت يسرع من تكاثرها وتخميرها.
لإجراء الاختبار، تم استخدام أنواع Zygosaccharomyces ellipsoideus، Debaryomyces disporus، Saccharomyces ellipsoideus وخمائر من المزر المخمر. تمت إضافة الفيتامينات (H، B₁، B₆، Bc، إينوزيت) إلى الوسط الغذائي ريدر (المكونات: جلوكوز — 20 جم/لتر، KH₂PO₄ — 1 جم/لتر، MgSO₄·7H₂O — 0.7 جم/لتر، (NH₄)₂SO₄ — 3 جم/لتر). تم إضافة هومات البوتاسيوم بتركيز 0.1٪.
النتائج
الجدول 1. استجابة الخمائر لهومات البوتاسيوم (وسط ريدر بالماء المقطر)
نظام التجربة | Saccharomyces ellipsoideus | Debaryomyces disporus | Zygosaccharomyces ellipsoideus | خمائر النبيذ |
---|---|---|---|---|
التحكم | 1.6 | 0.7 | 0.7 | 0.8 |
التحكم + هومات البوتاسيوم + B₆، PP | --- | --- | --- | 18.5 |
الوسط + الفيتامينات (H، B₁، B₆، PP) | --- | --- | --- | 4.7 |
الوسط + الفيتامينات + هومات البوتاسيوم | 22 | 5.5 | 13.5 | 85 |
الجدول 2. استجابة الخمائر لهومات البوتاسيوم (وسط ريدر بماء الصنبور)
نظام التجربة | Zygosaccharomyces ellipsoideus | Debaryomyces disporus | خمائر النبيذ | Saccharomyces ellipsoideus |
---|---|---|---|---|
التحكم | 8.9 | 1.9 | 11.5 | 4 |
التحكم + هومات البوتاسيوم | 14.0 | 7.0 | 71.0 | 14 |
الوسط + الفيتامينات (H، B₁، B₆، PP) | 23.0 | 78.0 | 56.0 | 53 |
الوسط + الفيتامينات + هومات البوتاسيوم | 295.0 | 104.0 | 104.0 | 103 |
الجدول 3. التأثير المتبادل بين الفيتامينات وهومات البوتاسيوم
نظام الوسط الغذائي | عدد الخلايا (×10³/مل) |
---|---|
التحكم | 1.2 |
الوسط + B₁ | 3.0 |
الوسط + B₁ + هومات البوتاسيوم | 28 |
الوسط + B₆ + PP | 5.0 |
الوسط + B₆ + PP + هومات البوتاسيوم | 83 |
الجدول 4. حساسية Saccharomyces ellipsoideus لتركيزات هومات البوتاسيوم
تركيز هومات البوتاسيوم (%) | عدد الخلايا (×10³/مل) |
---|---|
0 (التحكم) | 0.8 |
0.001 | 8.5 |
0.01 | 107 |
0.04 | 215 |
الجدول 5. نمو الخمائر حسب وقت الحضانة
مدة الحضانة | عدد الخلايا (×10³/مل) |
---|---|
4 أيام | 66 |
7 أيام | 117 |
14 يومًا | 215 |
الاستنتاجات
- تحفز المواد الدبالية (هومات البوتاسيوم) تكاثر الخمائر، خاصة في وجود الفيتامينات B₁، B₆، Bc، H والإينوزيت.
- تم الحصول على أفضل النتائج باستخدام Saccharomyces ellipsoideus على وسط ريدر مع إضافة الفيتامينات وهومات البوتاسيوم (0.02٪).
- المدة المثلى للتقييم هي 4 أيام من الحضانة عند 28°م.
- يعد اختبار الخمائر حساسًا وقابلًا للتكرار ومناسبًا لتقييم النشاط البيولوجي للمواد الدبالية.
الخاتمة
أكدت الدراسات التي أجريت أن المواد الدبالية لها تأثير محفز واضح على الخمائر. يمكن استخدام هذه الطريقة للبحث عن وعزل المركبات الفعالة فسيولوجيًا من الخث ومصادر طبيعية أخرى.